1. 常用的保溫方式
保溫的方式除有的 ELISA 儀器附有特制的電熱塊外，一般均采用水浴。將 ELISA 試劑盒板置于水浴箱中時，ELISA 板底應(yīng)貼著水面，這樣能使溫度迅速平衡。水浴保溫的優(yōu)勢在于能較好地解決因受熱不均衡所致的周圍孔與中央孔結(jié)果的吸光度差異，也就是 “邊緣效應(yīng)"。
2. 避免蒸發(fā)的方法
為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔，此時可讓反應(yīng)板漂浮在水面上。這樣既能防止水分蒸發(fā)影響反應(yīng)體系的濃度，又能保證反應(yīng)在相對穩(wěn)定的環(huán)境中進行。若用保溫箱，ELISA 試劑盒應(yīng)放在濕盒內(nèi)，濕盒要選用傳熱性良好的材料如金屬等，在盒底墊濕的紗布，最后將 ELISA 板放在濕紗布上。濕盒應(yīng)先放在保溫箱中預(yù)溫至規(guī)定的溫度，特別是在氣溫較低的時候更應(yīng)如此，以確保反應(yīng)板能夠迅速達到所需的溫度。
3. 反應(yīng)板放置的注意事項
無論是水浴還是濕盒溫育，反應(yīng)板均不宜疊放，以保證各板的溫度都能迅速平衡。如果反應(yīng)板疊放，會導(dǎo)致上下層板之間的溫度擴散不均勻，影響實驗結(jié)果的準確性。室溫溫育的反應(yīng)，操作時的室溫應(yīng)嚴格限制在規(guī)定的范圍內(nèi)，標準室溫溫度是指 20～25℃，但具體操作時可根據(jù)說明書的要求控制溫育。室溫溫育時，ELISA 試劑盒只要平置于操作臺上即可。應(yīng)注意溫育的溫度和時間應(yīng)按規(guī)定力求準確。為保證這一點，一個人操作時，一次不宜多于兩塊板同時測定，這樣可以更好地控制實驗條件，確保每個反應(yīng)都能在準確的溫度和時間下進行。
在線咨詢